我們?cè)谇拔摹秶X動(dòng)物血生化項(xiàng)目分析（上）》中介紹了嚙齒動(dòng)物的蛋白質(zhì)與肝膽功能指標(biāo)以及腎臟功能指標(biāo)的檢測(cè)意義。本文我們將繼續(xù)對(duì)嚙齒動(dòng)物的脂質(zhì)代謝、胰腺功能、糖代謝等相關(guān)常見血生化指標(biāo)進(jìn)行介紹。
脂代謝檢測(cè)
脂質(zhì)的運(yùn)輸對(duì)機(jī)體內(nèi)細(xì)胞功能、代謝等起著至關(guān)重要的作用，此外它還對(duì)組織起著保護(hù)作用，也作為生物體最重要的能量來源之一。由于脂質(zhì)具有很廣泛的作用，因此其穩(wěn)態(tài)也會(huì)隨著機(jī)體疾病等發(fā)生變化。
1.總膽固醇（Total cholesterol, TC）
血清總膽固醇指血液中各脂蛋白所含膽固醇總和。嚙齒類動(dòng)物的脂代謝指標(biāo)與人類相比差異明顯。大小鼠體內(nèi)的大部分膽固醇都以高密度脂蛋白形式存在，且缺乏膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（CETP）。膽固醇濃度的增加多見于動(dòng)物內(nèi)分泌、肝臟或腎臟疾?。唤档蛣t常見于動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)不良等。
2.甘油三酯（Triglyceride, TG）
甘油三酯構(gòu)成脂肪組織，參與TC合成以及血栓形成。需要注意的是，小鼠的血脂比較穩(wěn)定，對(duì)抗高血脂的能力很強(qiáng)，甘油三酯不容易升高，尤其C57BL小鼠一般不適合單純用于高甘油三酯血癥的造模。TG升高多見于動(dòng)物過度肥胖、糖尿病等，而營(yíng)養(yǎng)不良則是導(dǎo)致其降低的主要因素。
3.高密度脂蛋白（High-density lipoprotein, HDL）
高密度脂蛋白主要由肝臟和小腸合成，含有膽固醇、蛋白質(zhì)和磷脂，但甘油三酯很少。 與人類和非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物不同的是，大鼠體內(nèi)的HDL濃度高于LDL（低密度脂蛋白膽固醇），這可能是由于大鼠體內(nèi)缺乏膽固醇酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（CETP）所致。
高密度脂蛋白可以清除體內(nèi)膽固醇，當(dāng)HDL升高時(shí)，并非病理表現(xiàn)，無需關(guān)注；當(dāng)動(dòng)物出現(xiàn)動(dòng)脈硬化、糖尿病、慢性腎衰時(shí)，HDL表現(xiàn)為降低，且老年動(dòng)物更易出現(xiàn)降低情況。
4.低密度脂蛋白（Low-density lipoprotein, LDL）
低密度脂蛋白由極低密度脂蛋白轉(zhuǎn)化而來，含有豐富的蛋白質(zhì)、少量的膽固醇和甘油三酯。因此，LDL出現(xiàn)降低的情況，提示動(dòng)物機(jī)體血脂不高，可不予關(guān)注；但當(dāng)LDL出現(xiàn)升高時(shí)，應(yīng)該考慮甲狀腺功能低下、慢性腎衰等，尤其需要關(guān)注動(dòng)脈粥樣硬化，LDL是發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化的重要危險(xiǎn)指標(biāo)之一。
5.脂蛋白（Lipoprotein, Lip）
嚙齒類動(dòng)物會(huì)在肝臟和小腸中合成載脂蛋白（apoB-100和apoB-48），它們是血漿中運(yùn)輸脂類的重要成分。血漿中載脂蛋白水平上升，與糖尿病腎病、尿毒癥等相關(guān)；肝臟疾病可使載脂蛋白水平下降。
6.游離脂肪酸（Nonestesterified Fatty Acid, NEFA）
游離脂肪酸在肝臟、脂肪和乳腺組織中合成。當(dāng)動(dòng)物長(zhǎng)期使用高脂肪/低碳水化合物的飼料時(shí)，會(huì)導(dǎo)致NEFA合成減少；當(dāng)動(dòng)物患有伴有脂肪酶活性增高的高血脂癥時(shí)，會(huì)導(dǎo)致血漿中NEFA增加。
胰腺功能檢測(cè)
胰腺分為兩部分功能，一部分具有外分泌功能，這部分又稱為胰腺腺泡，是胰腺最大的組成部分，用來評(píng)估胰腺胰泡功能的檢測(cè)包括淀粉酶和脂肪酶。另一部分具有內(nèi)分泌功能，許多檢測(cè)都可用來評(píng)估胰腺的內(nèi)分泌功能，如傳統(tǒng)的血糖監(jiān)測(cè)，以及果糖胺和糖化血紅蛋白等。
1.淀粉酶（Amylase）
淀粉酶分子量較小，可被腎小球?yàn)V過，是尿液中唯一可見的血清酶。淀粉酶雖主要來源于胰腺，但唾液腺和小腸也可以產(chǎn)生。淀粉酶在大鼠和小鼠的唾液腺中的濃度高于其他實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，因此大小鼠淀粉酶的增高也可以考慮涎腺疾病。
通常，血淀粉酶濃度升高最常見于急性胰腺炎，此外，慢性胰腺炎的復(fù)發(fā)期和胰管阻塞也可致淀粉酶升高。但是淀粉酶升高的水平與胰腺炎的嚴(yán)重程度沒有直接的比例關(guān)系。由于淀粉酶可以經(jīng)腎臟排泄，因此任何原因?qū)е履I小球?yàn)V過率降低時(shí)，都可引起血清淀粉酶升高。
2.脂肪酶（Lipase）
脂肪酶是一組催化長(zhǎng)鏈脂肪酸甘油酯水解的酶。大多數(shù)血清脂肪酶來源于胰腺，少量來源于胃腸道黏膜。過量的脂肪酶經(jīng)腎臟濾過，因此在胰腺疾病早期，脂肪酶仍處于正常水平，當(dāng)病情逐漸加重時(shí)，脂肪酶水平才出現(xiàn)升高趨勢(shì)。
在慢性進(jìn)行性胰腺疾病中，受損的胰腺細(xì)胞會(huì)被結(jié)締組織取代，導(dǎo)致不能產(chǎn)生相應(yīng)的酶，因此淀粉酶和脂肪酶會(huì)呈現(xiàn)漸進(jìn)性降低。脂肪酶活性升高多見于腎臟和肝臟功能異常。此外，服用類固醇藥物可引起脂肪酶升高，但對(duì)淀粉酶無影響。
糖代謝檢測(cè)
1.葡萄糖（Glucose, Glu）
血糖的水平可以用來評(píng)估胰腺功能，其調(diào)節(jié)機(jī)制比較復(fù)雜，除了胰島素分泌缺乏外，胰高血糖素、甲狀腺素、腎上腺素和糖皮質(zhì)激素都可以使血糖升高；葡萄糖降低多見于營(yíng)養(yǎng)不良、慢性貧血等。由于成熟紅細(xì)胞會(huì)利用葡萄糖提供能量，因此在使用血漿或者血清樣本時(shí)，應(yīng)立即將血清或血漿與紅細(xì)胞分離，否則在室溫條件下，紅細(xì)胞會(huì)使樣本中血糖含量每小時(shí)下降10%。在檢測(cè)葡萄糖前，應(yīng)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行禁食，但對(duì)于嚙齒動(dòng)物（尤其小鼠）來說，由于它們屬于夜間進(jìn)食動(dòng)物，如果進(jìn)行夜間禁食，其代謝消耗相當(dāng)于靈長(zhǎng)類動(dòng)物禁食24-48小時(shí)（肝臟糖原基本耗盡），因此5-6小時(shí)禁食更適合小鼠。
2.糖化血紅蛋白（Glycated hemoglobin, GHb）
糖化血紅蛋白也稱為血紅蛋白A1C（HbA1c），是血紅蛋白與葡萄糖發(fā)生不可逆結(jié)合反應(yīng)的產(chǎn)物。當(dāng)機(jī)體發(fā)生高血糖時(shí)，血紅蛋白與葡萄糖結(jié)合增加，從而使糖化血紅蛋白升高，因此糖化血紅蛋白可以直接反映機(jī)體血糖水平。糖化血紅蛋白反映的是紅細(xì)胞壽命期間的平均血糖濃度，大鼠紅細(xì)胞壽命約60天，小鼠紅細(xì)胞壽命約為35-50天。因此和果糖胺相比，糖化血紅蛋白反映了更長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)的血糖水平。但需要注意的是如果檢測(cè)是基于高效液相層析法原理，由于溶血性貧血?jiǎng)游锏募t細(xì)胞壽命短，因此會(huì)導(dǎo)致糖化血紅蛋白結(jié)果出現(xiàn)假性降低。
3.果糖胺（Fructosamine）
果糖胺是葡萄糖與蛋白質(zhì)（尤其白蛋白）發(fā)生不可逆結(jié)合的產(chǎn)物。果糖胺升高表示動(dòng)物持續(xù)存在高血糖；但動(dòng)物發(fā)生低蛋白血癥，其血清果糖胺水平會(huì)假性降低。
有研究表明，果糖胺可在臨床研究中，可作為糖尿病動(dòng)物的血糖監(jiān)測(cè)的有效指標(biāo)。
其他
在臨床檢測(cè)中，還有一些生化項(xiàng)不針對(duì)任何器官或系統(tǒng)，但可以輔助提供一些診斷信息，如乳酸脫氫酶、肌酸激酶等。
1.肌酸激酶（creatine kinase, CK）
許多組織中都含有肌酸激酶，胃腸道、腎臟、脾臟和胰腺中含有少量CK，而骨骼肌、心肌和大腦中含有大量CK。因此當(dāng)骨骼肌、心肌受損時(shí)，CK會(huì)從細(xì)胞中滲出，導(dǎo)致血液中CK含量增加。
由于任何損傷肌細(xì)胞膜的物質(zhì)都可以導(dǎo)致血液中CK升高，在實(shí)際檢測(cè)時(shí)，可對(duì)CK同工酶檢測(cè)來進(jìn)行區(qū)分損傷來源。CK有3中主要同工酶：CK-MB（心臟型）、CK-BB（腦型）、CK-MM（骨骼型）。比較特殊的是，在大鼠血小板中，CK含量是紅細(xì)胞的30倍，且目前僅發(fā)現(xiàn)存在CK-BB。
另外，肌內(nèi)注射、手術(shù)等導(dǎo)致肌肉損傷可引起CK升高； EDTA、陽光直射或測(cè)定不及時(shí)可引起樣本中CK假性升高。
2.乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase, LDH）
乳酸脫氫酶是一種催化乳酸轉(zhuǎn)化為丙酮酸的血清酶。LDH一般不具有器官特異性，它來源廣泛，幾乎所有的組織中都含有LDH，但是物種間分布具有差異。如大鼠骨骼肌中分布最多，其次是心?。?7%）和肝臟（41%）。
LDH的升高雖然多見于肝臟受損和肌肉損傷，但是它缺乏評(píng)價(jià)肝損傷的特異性和敏感性。因此在嚙齒動(dòng)物中，LDH一般多用于檢測(cè)實(shí)驗(yàn)性誘導(dǎo)心肌損傷。為了提高LDH測(cè)定心肌損傷的特異性，也可以測(cè)定其同工酶，即LDH1和LDH2。
需要注意的是，在常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中，血小板、紅細(xì)胞、白細(xì)胞、肝臟中都可能會(huì)表達(dá)LDH同工酶，因此肝損傷、溶血和凝血均會(huì)混淆心臟損傷的診斷。另外，感染乳酸脫氫酶增高病毒（LDEV）的小鼠，血清中LDH含量可增高3-5倍。
3.C-反應(yīng)蛋白（C-reactive protein, CRP）
CRP是第一個(gè)在人類身上發(fā)現(xiàn)的急性期反應(yīng)蛋白（Acute Phase Reaction Proteins，APR），目前CRP也被認(rèn)為是嚙齒動(dòng)物的APR蛋白，肝細(xì)胞是合成CRP的主要部位。CRP的主要生物學(xué)功能是通過于配體（凋亡或壞死的細(xì)胞，或入侵的細(xì)菌、真菌、寄生蟲等的磷酰膽堿）結(jié)合，激活補(bǔ)體和單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)，將帶有配體的病原體或病理性細(xì)胞清除。在嚙齒動(dòng)物體內(nèi)，當(dāng)炎癥或創(chuàng)傷發(fā)生后6h內(nèi)，CRP可迅速升高至上千倍，在疾病治愈后，其含量急速下降。發(fā)生心臟病、敗血癥和腫瘤等多種疾病，CRP都會(huì)急劇上升。
比較特殊的是，健康大鼠體內(nèi)CRP值較高，且CRP的水平與年齡相關(guān)并呈正比。在健康小鼠和豚鼠血清中，幾乎無法檢出CRP。在這兩種動(dòng)物體內(nèi)，CRP不作為急性期蛋白而發(fā)揮作用。特別是豚鼠，在正常狀態(tài)和急性期豚鼠血清中，都無法檢出CRP，這主要是因?yàn)殡嗍驝RP基因中缺乏適當(dāng)?shù)膯?dòng)子區(qū)域。
延伸閱讀：嚙齒動(dòng)物血生化項(xiàng)目分析（上）
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